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我院輸血科采用微柱凝膠法鑒定血型 |
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文章來(lái)源: 作者: 發(fā)布時(shí)間:2010-08-31 10:28:31 訪問(wèn)人數(shù): |
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血型鑒定的正確與否對(duì)患者的輸血安全起著至關(guān)重要的作用。傳統(tǒng)的血型鑒定方法是采用玻片法和試管法,不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)力,而且敏感性差。由于敏感性不高以及易受試劑質(zhì)量影響,導(dǎo)致部分弱抗原病人血清不能呈現(xiàn)反應(yīng)。同時(shí)操作難以規(guī)范化、自動(dòng)化,檢測(cè)結(jié)果不易保存。不宜拍照,一旦出現(xiàn)糾紛而不能舉證原始的反應(yīng)結(jié)果格局?ㄊ轿⒅z法是輸血領(lǐng)域發(fā)展的一個(gè)新技術(shù),該方法具有以下特點(diǎn):1、敏感性高,可檢出低含量抗原,結(jié)果清晰明確,易判斷,保證了結(jié)果的準(zhǔn)確率。2、結(jié)果穩(wěn)定,可保存,可拍照。3、操作簡(jiǎn)便,減少使用玻璃用品,提高了操作穩(wěn)定性。
微柱凝膠法是建立在傳統(tǒng)血型血清學(xué)基礎(chǔ)上的一項(xiàng)免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)。。
原理:(1)人紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)(其本質(zhì)為血凝反應(yīng)),(2)檢測(cè)系統(tǒng)是在微柱中(載體)將反應(yīng)介質(zhì)凝膠(sephdexG-100x或50葡聚糖膠)或小玻璃珠裝入微柱中;(3)微膠或小玻璃珠的間隙具有分子篩作用凝集的紅細(xì)胞(結(jié)合的)被留在微柱上面成帶狀或凝集顆粒散布凝膠中間。未凝集的紅細(xì)胞(即未結(jié)合、游離的)通過(guò)離心后沉入微柱底部;(4)微柱凝膠中所含的特異性單克隆抗-A抗、抗-B試劑檢測(cè)紅細(xì)胞上相應(yīng)的血型抗原,或在含凝膠的微柱上用標(biāo)準(zhǔn)A、B型紅細(xì)胞檢測(cè)血清中相應(yīng)的血型抗體,從而堅(jiān)定紅細(xì)胞的血型。微膠卡做血型鑒定,能夠用肉眼直接觀察到極弱的陽(yáng)性反應(yīng)(±),能使肉眼不易察覺(jué)的凝集(鏡下1~3個(gè)紅細(xì)胞的凝集)明顯化,能夠很好地把血型血清學(xué)技術(shù)與凝膠分子篩選技術(shù)有機(jī)結(jié)合起來(lái),具有簡(jiǎn)便,敏感,易于批量操作,結(jié)果直觀,穩(wěn)定可靠,吸取標(biāo)本的量及結(jié)果的判讀易于標(biāo)準(zhǔn)化,穩(wěn)定的反應(yīng)結(jié)果圖譜利于保存和拍照。還自帶質(zhì)控減少了產(chǎn)生錯(cuò)誤的概率。是醫(yī)院輸血技術(shù)發(fā)展的方向。
方法 :微柱凝膠法按卡式血型鑒定操作手冊(cè)進(jìn)行。紅細(xì)胞用稀釋液配成2%的紅細(xì)胞懸液,并按說(shuō)明書提示標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果,紅細(xì)胞完全降至柱底者為陰性,完全或部分被凝膠阻擋者為陽(yáng)性。
臨床工作中,少數(shù)血型抗體較弱或抗原減弱的新生兒、老年及某些惡性疾病患者細(xì)胞凝集現(xiàn)象會(huì)有不同程度的減弱,有的用肉眼無(wú)法觀察到,故血型血清學(xué)檢測(cè)的難度較大。小兒特別是新生兒嬰兒在出生4~6個(gè)月之內(nèi)由于血漿(清)中ABO抗體活性太弱并且含有來(lái)自母體的抗體,免疫反應(yīng)相對(duì)較弱,尤其是出生3~4個(gè)月時(shí)的生理性低γ球蛋白血癥,使IgG水平相當(dāng)于成人的35%左右,1~2歲時(shí)IgG水平也僅相當(dāng)于成人的60%,直到13歲以后才基本達(dá)到成人水平。所以新生兒血型只能由檢測(cè)紅細(xì)胞抗原正定型來(lái)檢定其ABO血型。微柱凝膠技術(shù)用于鑒定血型,反應(yīng)結(jié)果可靠和特異性強(qiáng)等特點(diǎn)。此外其用血量少,對(duì)于新生兒及老年人等不易抽取血液標(biāo)本的患者也比較適合。
在常規(guī)檢測(cè)A、B、D抗原試驗(yàn)中,微柱凝膠全自動(dòng)血型鑒定系統(tǒng)對(duì)標(biāo)本抗凝要求較高,抗凝EDTA為最佳,它不但抗凝效率高,而且可以預(yù)防補(bǔ)體的激活和紅細(xì)胞溶血。對(duì)標(biāo)本需求量較少,尤其適合檢測(cè)兒科和新生兒科標(biāo)本。操作人員接觸血液的機(jī)會(huì)減少,被感染血源性疾病的機(jī)率大大降低。微柱凝膠法對(duì)標(biāo)本的質(zhì)量也有嚴(yán)格的要求,如采集病人標(biāo)本時(shí)沒(méi)有充分抗凝,使血漿中含有小凝塊,或被細(xì)菌污染等,就有可能導(dǎo)致假陽(yáng)性,所以要求血樣必須新鮮,無(wú)溶血,并且要充分抗凝等,這樣實(shí)驗(yàn)結(jié)果才能準(zhǔn)確可靠。是未來(lái)輸血發(fā)展的方向?傊,微柱凝膠法簡(jiǎn)單且可標(biāo)準(zhǔn)化操作,結(jié)果清晰可靠,便于保存,實(shí)現(xiàn)血型鑒定的標(biāo)準(zhǔn)化,規(guī)范化,大提高了臨床輸血的安全性。適合臨床推廣使用。適合臨床推廣使用;我省及周邊地區(qū)已與幾年前已開展微柱凝膠法血型鑒定。微柱凝膠法血型鑒定的開展使我院輸血技術(shù)又上一個(gè)新的臺(tái)階。
(輸血科)
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